El cortisol se ha utilizado ampliamente como biomarcador del estrés y el envejecimiento, pero los efectos de confusión y la alteración del eje hipotálamo-hipófisis-suprarrenal pueden dar lugar a una interpretación errónea de los resultados basados en una única medición. Una posible alternativa es la medición conjunta del cortisol y de la hormona suprarrenal sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEAS), un antagonista de los glucocorticoides que modula la respuesta al estrés. A partir de los datos de 969 personas del estudio «Midlife in the United States», este trabajo tuvo como objetivo investigar la influencia de la edad, el sexo y el grupo biosocial autoidentificado (SIBG) sobre el DHEAS, el cortisol y la relación cortisol/DHEAS, para comprobar si estas hormonas aportan capacidad predictiva a las estimaciones de la edad epigenética, y para comparar el rendimiento de estas tres medidas hormonales a la hora de predecir la aceleración de la edad epigenética (EAA) utilizando relojes epigenéticos de sexo: Horvath, Horvath de piel y sangre (Horvath2), Hannum, PhenoAge, GrimAge y DunedinPACE. Nuestros resultados revelaron que la edad, el sexo y el SIBG influían significativamente en las tres medidas hormonales. Tras controlar estos factores biodemográficos, observamos que la relación cortisol/DHEAS era el mejor predictor de los relojes epigenéticos. Se observó una correlación significativa y positiva entre el cortisol y la edad epigenética de Hannum, así como entre la relación cortisol/DHEAS y tres de los seis relojes (Hannum, Horvath2 y PhenoAge), pero no se encontraron asociaciones significativas entre el DHEAS y la edad epigenética. La relación cortisol/DHEAS también presentó una correlación significativa y positiva con la edad epigenética de Hannum (EAA). Ni el DHEAS ni el cortisol se asociaron de forma significativa con la EAA en ningún reloj epigenético. Nuestros resultados refuerzan la importancia de medir conjuntamente el cortisol y el DHEAS en los estudios que investigan el efecto del estrés en los procesos de envejecimiento.