El cáncer colorrectal (CCR) es una de las principales causas de mortalidad por cáncer, y hasta el 80 % de los casos de CCR avanzado presentan mutaciones en el gen p53. Lamentablemente, el desarrollo de nuevos compuestos dirigidos contra la p53 mutante es bastante limitado. Se han descrito los efectos anticancerígenos de la dehidroepiandrosterona (DHEA) en diversos tipos de cáncer. Sin embargo, el efecto supresor de la DHEA sobre las células de CCR que albergan el gen p53 de tipo salvaje o mutado sigue siendo objeto de controversia. Este estudio se centró en revelar el mecanismo supresor y el efecto de la DHEA sobre la tumorigénesis de las células del CCR en presencia del gen p53 de tipo salvaje o mutante. Demostramos que la DHEA provoca la muerte de las células del CCR y la detención del ciclo celular de forma dependiente de la dosis y del tiempo. Cabe destacar que la DHEA muestra efectos inhibidores similares sobre las células del CCR, independientemente del estado del gen p53. Estudios posteriores revelan que la DHEA induce estrés del retículo endoplásmico (RE) y activa la vía de señalización PERK/eIF2/ATF4/CHOP para activar la autofagia seguida de la apoptosis, lo cual se confirmó mediante la supresión del ácido 4-fenilbutírico (un inhibidor del estrés del RE) o la silenciación de ATF4 o CHOP. La apoptosis inducida por la DHEA se atenuó al silenciar el genATG5tanto en células de CCR p53+/+como en p53-/-, lo que indica que la autofagia regula la apoptosis. Además, el tratamiento con DHEA acompañado de bafilomicina A1 (un inhibidor de la degradación de los autofagosomas) conduce a la acumulación de los niveles de ATF4, CHOP, DR5 y p21 en las células de CCR, lo que sugiere que el mecanismo de autofagia degradativa regula estas cuatro moléculas. En consonancia con ello, la DHEA demuestra su efecto inhibidor al suprimir la formación de tumores de CCRin vivo. En conjunto, aportamos pruebas convincentes de que la DHEA es un candidato terapéutico potencial para el tratamiento de pacientes con CCR, independientemente del estado de p53, a través del eje estrés del retículo endoplásmico-PERK-autofagia-apoptosis.