Le cortisol est largement utilisé comme biomarqueur du stress et du vieillissement, mais des effets de confusion et une perturbation de l’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien peuvent conduire à une interprétation erronée des résultats basés sur une seule mesure. Une alternative possible consiste à mesurer simultanément le cortisol et le sulfate de déhydroépiandrostérone (DHEAS), une hormone surrénale qui agit comme antagoniste des glucocorticoïdes et module la réponse au stress. À partir des données de 969 participants à l’étude « Midlife in the United States », cette étude visait à examiner l’influence de l’âge, du sexe et du groupe biosocial auto-déclaré (SIBG) sur le DHEAS, du cortisol et du rapport cortisol/DHEAS, afin de vérifier si ces hormones renforcent la capacité prédictive des estimations de l’âge épigénétique, et de comparer les performances de ces trois mesures hormonales dans la prédiction de l’accélération de l’âge épigénétique (EAA) à l’aide des horloges épigénétiques de sexe : Horvath, Horvath (peau et sang) (Horvath2), Hannum, PhenoAge, GrimAge et DunedinPACE. Nos résultats ont révélé que l’âge, le sexe et le SIBG influençaient de manière significative ces trois mesures hormonales. Après avoir pris en compte ces facteurs biodémographiques, nous avons constaté que le rapport cortisol/DHEAS était le meilleur prédicteur des horloges épigénétiques. Une corrélation significative et positive a été observée entre le cortisol et l’âge épigénétique selon Hannum, ainsi qu’entre le rapport cortisol/DHEAS et l’âge épigénétique selon trois des six horloges (Hannum, Horvath2, PhenoAge), mais aucune association significative n’a été mise en évidence entre le DHEAS et l’âge épigénétique. Le rapport cortisol/DHEAS présentait également une corrélation significative et positive avec l’âge épigénétique de Hannum (EAA). Le DHEAS et le cortisol n’étaient pas significativement associés à l’EAA pour aucune horloge épigénétique. Nos résultats soulignent l’importance de mesurer conjointement le cortisol et le DHEAS dans les études portant sur l’effet du stress sur les processus de vieillissement.